pyautoguiを用いて「:」の入力をしたいです。

Windows環境で再現しました。
USキーボード以外で発生する既知の不具合のようです。
Some characters are not working with German layout keyboard #46

:はShiftキー入力不要なのにもかかわらず、Shift+:キーが送信され*が入力されるようです。

上記URLと同様の手法にてpyautoguiを直接修正することで、とりあえず回避はできました。

～\pyautogui\_pyautogui_win.py

def _keyDown(key):
    # 略
    needsShift = pyautogui.isShiftCharacter(key)

    # 以下を追加
    if key == '@': needsShift = False
    if key == '^': needsShift = False
    if key == ':': needsShift = False

    """
    # OLD CODE: The new code relies on having all keys be loaded in keyboardMapping from the start.
    if key in keyboardMapping.keys():
    # 略

テストソース

import pyautogui

s = r'!"#$%&\'()*+,-./0123456789:;<=>?@ABCDEFGHIJKLMNOPQRSTUVWXYZ[\]^_`abcdefghijklmnopqrstuvwxyz{|}~'
print(s)
pyautogui.click(200, 200) # テキストエディタなどのウインドウ位置
pyautogui.typewrite(s)

テキストエディタ画面の結果

!"#$%&\'()*+,-./0123456789:;<=>?@ABCDEFGHIJKLMNOPQRSTUVWXYZ[\]^_`abcdefghijklmnopqrstuvwxyz{|}~